先說重點

腫瘤治療性疫苗是指通過誘導或增強機體針對腫瘤抗原的特異性主動免疫反應，從而達到控制和殺傷腫瘤細胞、清除微小殘留病灶以及建立持久的抗腫瘤記憶等治療作用的一類療法。隨著基因測序成本的大幅下降、人工智能（AI）及mRNA等技術的發(fā)展，腫瘤治療性疫苗進入了全新的發(fā)展時期，大批制藥巨頭和Biotech加入到腫瘤治療性疫苗的研發(fā)熱潮中，例如，10月12日，默沙東剛剛為從Moderna授權1款癌癥mRNA疫苗支付了2.5億美元。

醫(yī)藥魔方Pro：CDE為何在這樣一個時間點發(fā)布了《腫瘤治療性疫苗臨床試驗技術指導原則（征求意見稿）》？這份《征求意見稿》釋放了怎樣的信號？

陳樞青教授：人類很早就知道，腫瘤的天敵就是人體免疫。腫瘤細胞一旦產(chǎn)生，免疫細胞就會對其進行清除，這是體內(nèi)持續(xù)發(fā)生的動態(tài)平衡。只要免疫系統(tǒng)正常，一般人不會罹患腫瘤。一百年前，被譽為免疫治療之父的著名醫(yī)生William Coley用滅活的膿鏈球菌與粘質(zhì)沙雷氏菌過濾的混合物來治療腫瘤患者，在幾百例患者取得療效，就是利用了細菌抗原能激活體內(nèi)免疫系統(tǒng)的性質(zhì)。但是，由于非特異性激活免疫系統(tǒng)會帶來很大的毒性反應，Coley毒素并沒有能夠在臨床長期推廣。最近幾十年，科學家發(fā)明了抗體藥物，如HER2抗體、CD20抗體等，這類治療方法屬于被動性免疫治療，其原理是利用抗體藥物靶向腫瘤細胞表面的腫瘤相關抗原，再吸引免疫細胞來殺死腫瘤細胞。這類藥物已經(jīng)在臨床上顯示了良好效果，已經(jīng)得到了廣泛使用。近年來，科學家還發(fā)明了CAR-T技術，將抗體的識別區(qū)利用轉(zhuǎn)基因技術在患者自身T細胞上表達，使經(jīng)改造的T細胞變成能夠靶向腫瘤細胞的特異性T細胞。其治療效果極為顯著，部分患者得到了治愈，但是CAR-T技術對實體瘤患者的治療效果仍不理想。另一類免疫檢查點抑制劑藥物，如PD-1抗體、PD-L1抗體和CTLA-4抗體等，能夠解除T細胞的抑制作用，從而讓T細胞繼續(xù)殺傷腫瘤。但這類藥物只對那些在自身腫瘤組織中已有T細胞浸潤但其殺傷能力被免疫檢查點抑制了的患者，才表現(xiàn)出良好的效果，為其帶來長期生存的希望。但是，這類患者的比例大概只占20%-30%。

利用疫苗來教育免疫細胞更有效地識別并殺傷腫瘤細胞，從而實現(xiàn)預防腫瘤復發(fā)以及治療腫瘤，是科學家長期的夢想。但是長期的努力并沒有成功，主要原因是對腫瘤抗原的認識不足，使得大量的研究工作都是枉然。進入新世紀后，隨著基因測序成本的大幅度下降，科學家才有機會對腫瘤細胞進行全面的基因突變分析，從而認識到T細胞識別腫瘤的天然靶標是新生抗原。

所謂新生抗原是基因突變產(chǎn)生的蛋白質(zhì)片段并被細胞的MHC分子遞呈到細胞膜表面，其實質(zhì)是內(nèi)源性的異物，因此可以被自身T細胞有效識別。如果用這類抗原來做疫苗，那不就是可以激活特異性免疫嗎？近5年歐美和我國科學家在這個領域展開了激烈的競爭，目前來看在利用人工智能的新生抗原分析和疫苗設計方面中國科學家領先，而在臨床試驗方面歐美科學家領先。美國FDA和歐洲EMA分別設立了腫瘤卓越中心和創(chuàng)新事務小組，主要負責像腫瘤新生抗原個體化疫苗這類具有高度創(chuàng)新類的新藥產(chǎn)品注冊申報，可以及時推進這類疫苗臨床試驗。

CDE選擇在這樣一個時間點發(fā)布《腫瘤治療性疫苗臨床試驗技術指導原則（征求意見稿）》，體現(xiàn)出其對腫瘤治療性疫苗這類具有明顯臨床價值的創(chuàng)新藥技術發(fā)展的重視、緊盯國際前沿技術發(fā)展，旨在解決產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新發(fā)展的“卡脖子”問題、提升產(chǎn)業(yè)整體水平、使其與國際水平保持同步。CDE的這一舉動也恰恰證明了目前已經(jīng)到了腫瘤治療性疫苗發(fā)展的關鍵時期，需要國家監(jiān)管體系的介入與大力推進才能使我國在該技術領域保持領先，盡早造福更多的腫瘤患者。

醫(yī)藥魔方Pro：從該《征求意見稿》中，您讀到了哪些重要信息？

陳樞青教授：該《征求意見稿》對腫瘤治療性疫苗產(chǎn)品開發(fā)具有重要的指導性意義，值得此領域相關人員詳細地解讀學習。

比如，在臨床試驗設計的一般考慮因素中，該《征求意見稿》指出針對受試者人群，可在早期探索性臨床試驗中納入多個瘤種的受試人群以期獲得更多的數(shù)據(jù)；對于那些基于生物信息學分析的個體化疫苗、或利用患者自身組織或細胞制成的治療性疫苗來說，每個患者的遺傳背景和腫瘤組織學都不同，導致疫苗制劑不同，在異質(zhì)性患者群體中分析臨床試驗結(jié)果可能格外困難。因此，在腫瘤治療性疫苗的臨床試驗中選擇患者群體時，應仔細考慮患者群體的異質(zhì)性對試驗設計和評價的影響。該說明體現(xiàn)了CDE充分理解腫瘤存在的高度異質(zhì)性，也證明腫瘤個體化治療是未來的發(fā)展方向，通過不斷提升抗腫瘤治療的精準性，使腫瘤患者能接受到更為適合自己的治療藥物。

對于個體化腫瘤治療性疫苗，由于抗原篩選主要依賴于計算機軟件算法，故抗原篩選軟件應綜合評估腫瘤新生抗原誘導特異性抗腫瘤免疫反應的能力，包括但不限于腫瘤基因組突變、基因表達量、HLA 基因型別、HLA雜合丟失、抗原親和力預測、突變抗原與正常蛋白質(zhì)組序列對比等多種分析。該說明體現(xiàn)了CDE已對個體化腫瘤治療性疫苗進行充分研究，其所提出的對抗原篩選軟件需要考慮的評估因素，都是個體化腫瘤治療性疫苗研發(fā)企業(yè)需要解決與分析的重要關鍵點。CDE還提出針對個性化或自體疫苗，其制備時間較長，受試者可能在等待治療期間出現(xiàn)疾病復發(fā)或進展。對于自體來源的治療性疫苗產(chǎn)品，由于各種來源材料和/或制造原因，少數(shù)受試者還可能因生產(chǎn)失敗無法接受疫苗治療。因此，該指南建議申辦者應盡量在確證性臨床試驗開始之前，完成疫苗生產(chǎn)工藝的優(yōu)化，提高受試者按預定計劃接受疫苗治療的比例。

陳樞青教授：依據(jù)抗原的特異性，腫瘤抗原主要分為腫瘤特異性抗原（TSA）和腫瘤相關抗原（TAA）。TSA只存在于癌細胞表面，而在正常組織中不表達；TAA通常在腫瘤細胞中有很高的表達，而在正常組織中低表達。

全球首個治療性腫瘤疫苗 Melacine 由 Corixa 公司原研，于1999年在加拿大上市，用于晚期黑色素瘤的治療。后續(xù)GSK、默克、賽諾菲在內(nèi)的藥企巨頭都在癌癥疫苗領域投入重金研發(fā)癌癥疫苗。2011年前后，腫瘤疫苗產(chǎn)品的研發(fā)達到一段黃金期。然而，2013年下半年以來，多個重磅疫苗的三期臨床試驗遭遇滑鐵盧，即便是被FDA批準上市的首個腫瘤疫苗Provenge，也因為有效性和成本的問題被收購。從研發(fā)策略來看，這些疫苗選擇的都是TAA。由于TAA是機體自身具有的蛋白（只是在癌癥細胞上大量表達而已），患者對這些抗原早就有“中樞免疫耐受”，因此無論怎樣刺激，也不能達到目標療效。所以TAA并非理想“抗原”。

新生抗原（neoantigen，紐安津即為該單詞的音譯）僅存在于腫瘤細胞，是TSA中的一類，其可通過多種機制發(fā)生，比如突變多肽、異?；虮磉_、病毒感染和異常轉(zhuǎn)錄后修飾。相較于TAA，新生抗原除了具有高度腫瘤特異性，通常還有更強的免疫原性和更好的主要組織相容性復合體（MHC）親和性，并且不受中樞免疫耐受性的影響，因此在腫瘤臨床治療應用上具有極大的潛力。從2013年Rosenberg團隊率先利用外顯子技術在腫瘤細胞系上發(fā)現(xiàn)腫瘤新生抗原并驗證了其能激起機體免疫反應至今，基于新生抗原的個體化腫瘤疫苗已經(jīng)得到了巨大的發(fā)展。已有動物試驗和臨床研究結(jié)果表明，如果腫瘤新生抗原能成功地被抗原遞呈細胞以抗原-MHC復合物的形式呈遞至細胞表面，再被T細胞的TCR所識別并與之結(jié)合，即可能激活這些T細胞特異性地殺傷腫瘤細胞并產(chǎn)生免疫記憶效應，從而部分或完全消退腫瘤并有效預防腫瘤復發(fā)。

新生抗原腫瘤疫苗與其他治療性腫瘤疫苗的開發(fā)過程的最大不同即在于需要鑒定獲得針對患者個體化的腫瘤新生抗原。其他治療性腫瘤疫苗可根據(jù)已提前確認的腫瘤抗原靶點，按照優(yōu)化的生產(chǎn)工藝制備得到可長期貯存的off-the-shelf產(chǎn)品。而個體化新生抗原腫瘤疫苗制備的第一步是利用人工智能分析模型，對比分析患者腫瘤組織與正常組織的DNA和RNA測序信息，通過MHC親和力、抗原免疫原性、潛在毒性、T細胞激活能力、腫瘤細胞殺傷能力等多維度的建模預測，從獲得的腫瘤突變信息中鑒定優(yōu)選出腫瘤新生抗原，用于后續(xù)個體化疫苗的設計以及制備生產(chǎn)。由此可見，如何高效、準確、快速地鑒定得到新生抗原是開發(fā)個體化新生抗原腫瘤疫苗需要解決的第一個問題。此外，由于腫瘤患者通常疾病進展快，而個體化疫苗與off-the-shelf產(chǎn)品相比，制備耗時長，如何開發(fā)出普適性強、能夠在短時間內(nèi)、高成功率地生產(chǎn)不同序列的疫苗產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，是需要解決的第二個問題。最后，由于腫瘤患者的異質(zhì)性，在對患者開展治療后，怎樣選取合適的生物活性標志物與臨床療效指標，評估生物活性標志物與臨床療效的相關性，探索標志物的療效預測或預后價值的相關性，也是需要解決的問題。

醫(yī)藥魔方Pro：紐安津是如何克服“新生抗原疫苗”開發(fā)挑戰(zhàn)的？

陳樞青教授：紐安津公司核心團隊自2009年開展腫瘤新生抗原研究，是全球最早基于新生抗原研發(fā)個體化免疫治療新藥的公司之一，公司致力于通過領先的人工智能分析技術開發(fā)個體化腫瘤免疫治療產(chǎn)品，目前也已經(jīng)搭建了生物信息人工智能分析、個體化疫苗制劑、精準免疫治療監(jiān)測三大自主研發(fā)核心技術平臺。目前已通過140多次免疫多肽組質(zhì)譜實驗以及研究者發(fā)起臨床試驗，獲得近80萬條遞呈抗原序列和1500多條新生抗原免疫原性數(shù)據(jù)。同時利用人工智能算法，開發(fā)了一款iNeo智能分析軟件，能夠?qū)崿F(xiàn)從原始測序數(shù)據(jù)分析、體細胞突變鑒定、HLA分型鑒定、新生抗原多肽預測及優(yōu)選、到最終疫苗多肽序列設計的一站式全自動分析。真實臨床試驗患者隨訪的ELISpot實驗結(jié)果已經(jīng)有力地證明，iNeo智能分析軟件的新生抗原預測及優(yōu)選的有效率高達82%。可以說紐安津在新生抗原鑒定及優(yōu)選方面已達國際領先水平。

我們布局了基于新生抗原的腫瘤個體化多肽疫苗、特異性T細胞產(chǎn)品、個體化mRNA疫苗、多肽自組裝疫苗以及一系列通用型疫苗等管線。針對我們的第一款產(chǎn)品iNeo-Vac-P01（腫瘤新生抗原個體化多肽疫苗），公司研發(fā)人員對真實臨床患者的樣本進行分析設計，得到新生抗原多肽疫苗序列，再以這些疫苗序列為基礎摸索優(yōu)化不同序列的多肽合成制備工藝以及疫苗制劑生產(chǎn)工藝，最終得到了普適性強、可在4-6周內(nèi)完成產(chǎn)品制備、滿足患者臨床需求的新生抗原多肽腫瘤疫苗生產(chǎn)工藝。

醫(yī)藥魔方Pro：公司官網(wǎng)稱，紐安津的個體化腫瘤新生抗原多肽疫苗iNeo-Vac-P01已在多家知名三甲醫(yī)院完成研究者發(fā)起的臨床試驗。新生抗原疫苗作為一種全新的治療手段，先前開展科研臨床試驗的過程中遇到了哪些挑戰(zhàn)？

陳樞青教授：我們團隊開發(fā)的第一款個體化腫瘤治療性疫苗——iNeo-Vac-P01（腫瘤新生抗原個體化多肽疫苗）自2018年1月與浙江大學附屬醫(yī)院合作開展了7項科研臨床研究，治療患者70+例，相關臨床研究結(jié)果已發(fā)表在國際頂尖臨床醫(yī)學期刊Clinical Cancer Research及免疫前沿雜志Frontiers in Immunology，自2018年連續(xù)五年分別在美國臨床腫瘤學會（ASCO）年會、美國癌癥研究協(xié)會（AACR）、美國癌癥免疫治療學會 (SITC)、中國臨床腫瘤學大會（CSCO）上報道臨床研究結(jié)果。基于上述臨床研究，紐安津生物已收集1500+條多肽疫苗的實際臨床反饋，建立了國內(nèi)最大的新生抗原個體化免疫治療臨床研究隨訪數(shù)據(jù)庫，為新生抗原疫苗設計與算法開發(fā)提供了豐富數(shù)據(jù)參考。

團隊于2020年5月在Clinical Cancer Research上正式發(fā)表了全球首個針對標準治療失敗的晚期泛癌種實體瘤患者的新生抗原多肽疫苗單藥治療的臨床試驗結(jié)果。在論文報道的入組受試者中，超過70%為經(jīng)過3線及以上治療失敗的晚期患者。所有患者在常規(guī)療程內(nèi)均無嚴重不良反應，總體疾病控制率（DCR）為71.4%；38.1%的受試者病灶在新生抗原多肽疫苗治療過程中出現(xiàn)縮小，最大縮少比例為16.7%，明顯優(yōu)于歷史數(shù)據(jù)；通過治療后患者外周T細胞的ELISpot實驗，高達80%的疫苗多肽能夠被檢測到抗原特異性的T細胞識別；證明了基于新生抗原的個體化腫瘤疫苗的安全性及有效性。

2021年8月，團隊在浙江省人民醫(yī)院開展的《基于新生抗原的個體化腫瘤疫苗用于標準治療失敗的晚期胰腺癌患者可行性、安全性及初步有效性研究》的臨床試驗結(jié)果發(fā)表于Frontiers in Immunology雜志。所有受試者均未出現(xiàn)嚴重的疫苗相關副反應；OS、疫苗相關OS以及PFS的平均值分別為24.1，8.3和3.1個月，明顯優(yōu)于歷史數(shù)據(jù)。

每個患者的遺傳背景和腫瘤組織學都不同，導致疫苗制劑不同，在異質(zhì)性患者群體中分析臨床試驗結(jié)果可能格外困難。因此，在腫瘤治療性疫苗的臨床試驗中選擇哪些患者群體作為受試者，以及臨床研究中如何設計觀察指標是個體化腫瘤治療性疫苗臨床研究中遇到的挑戰(zhàn)。

醫(yī)藥魔方Pro：關于iNeo-Vac-P01，最近有新進展可以分享嗎？

陳樞青教授：2022年9月29日，紐安津生物在Frontiers in Immunology雜志發(fā)表了題為“Combination Treatment of Radiofrequency Ablation and Peptide Neoantigen Vaccination: Promising Modality for Future Cancer Immunotherapy”的臨床研究。結(jié)果顯示：如果晚期泛癌種患者在接受iNeo-Vac-P01治療前6個月內(nèi)進行了局部射頻消融治療（RFA），則能夠進一步改善腫瘤微環(huán)境并提升臨床療效。團隊也通過小鼠模型驗證了RFA與iNeo-Vac-P01的抗腫瘤協(xié)同作用；同時還進一步發(fā)現(xiàn)RFA與iNeo-Vac-P01以及免疫檢查點抑制劑三者聯(lián)合治療可進一步增強抗原特異性免疫應答，提升腫瘤抑制作用，為標準治療失敗的晚期實體瘤患者提供了可行、有效的免疫聯(lián)合治療新方案。

醫(yī)藥魔方Pro：總體來看，目前國外及國內(nèi)腫瘤治療性疫苗開發(fā)分別處于怎樣的階段？今年該領域有值得關注的新成果嗎？

陳樞青教授：總體來看，雖然國內(nèi)外近十年來均無新的腫瘤治療性疫苗獲批上市，但是國外腫瘤治療性疫苗的開發(fā)在數(shù)量和臨床試驗進度方面均領先于國內(nèi)。今年8月發(fā)表在Nature Cancer雜志的題為 “Cancer vaccines: the next immunotherapy frontier”的綜述文章匯總了針對不同腫瘤抗原類型的腫瘤疫苗的產(chǎn)品開發(fā)現(xiàn)狀。文章表明目前針對已確認的共享抗原開發(fā)的腫瘤疫苗，無論從數(shù)量和臨床試驗進度來看仍領先于針對個體化新生抗原開發(fā)的腫瘤疫苗。

今年腫瘤治療性疫苗尤其是個體化新生抗原腫瘤疫苗領域除了紐安津與上述團隊外，也有不少其他團隊發(fā)表了值得關注的新成果。例如，丹麥的Inge Marie Svane團隊發(fā)表了采用帶有CD8+ T細胞誘導佐劑CAF?09b（以脂質(zhì)體為基礎的陽離子佐劑產(chǎn)品）的個體化新生抗原多肽疫苗EVX-01聯(lián)合PD-1單抗藥物治療晚期轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者的臨床研究結(jié)果，證明了EVX-01產(chǎn)品的可行性與安全性，并且在接受疫苗治療的5位病人體內(nèi)都發(fā)現(xiàn)了持久的EVX-01特異性T細胞反應。5例患者中有3例經(jīng)評估為OR（2名PR，1名CR）；這些結(jié)果展示出EVX-01與PD-1單抗聯(lián)用產(chǎn)生的抗腫瘤潛能。

醫(yī)藥魔方Pro：展望未來3-5年，您認為腫瘤治療性疫苗研發(fā)會取得怎樣的突破？您給紐安津制定了怎樣的發(fā)展目標？

陳樞青教授：展望未來3-5年，隨著腫瘤治療性疫苗尤其是新生抗原腫瘤疫苗被越來越多的公司及研究機構所關注，會有更多的研究者加入到該技術的開發(fā)中，從而推動該領域的快速發(fā)展。按照現(xiàn)在的臨床研究進展速度，預計國內(nèi)外會有多個腫瘤治療性疫苗將于未來5年申請上市，從而使更多的腫瘤患者獲益。

全球來看，目前已有25個針對腫瘤新生抗原的個體化藥物獲得FDA或EMA批準進入臨床研究階段，其中與紐安津iNeo-Vac-P01同為多肽類的占比最高，有6個（2個已進入II期臨床試驗）。且其臨床研究結(jié)果已陸續(xù)披露，預計最快的同類產(chǎn)品將于明年提交上市申請。紐安津的第一款個體化腫瘤治療性疫苗——iNeo-Vac-P01目前已完成pre-IND溝通會議，準備近期就提交IND申請。

對紐安津來說，我們要踏踏實實做研究，利用真實實驗數(shù)據(jù)來驗證人工智能分析結(jié)果的準確性，不斷提高算法的水平，研發(fā)不同形式的新生抗原疫苗，尋找最合適的臨床適應癥，讓患者的腫瘤得以治愈。另一方面新生抗原不僅是腫瘤的治療靶點，也是其他難治性疾病的靶點，如糖尿病、動脈粥樣硬化、早老癡呆癥等，我們要把新生抗原的預測算法做到最優(yōu)，逐步研發(fā)治療這些疾病的藥物，成為一家擁有硬科技平臺技術的公司。